兔血中超氧化物歧化酶的纯化制备方法

基本信息

申请号 CN201510407291.0 申请日 -
公开(公告)号 CN105039273A 公开(公告)日 2015-11-11
申请公布号 CN105039273A 申请公布日 2015-11-11
分类号 C12N9/02(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 张姝倩;葛安山;孙莎莎;陈宴霞;宋玉龙 申请(专利权)人 青岛中创生物科技有限公司
代理机构 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 青岛康大食品有限公司;青岛中创生物科技有限公司
地址 266500 山东省青岛市黄岛区滨海大道8399号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明属于生物蛋白技术领域,具体涉及兔血中超氧化物歧化酶的纯化制备方法。该方法主要包括如下工艺步骤:将兔血中加入抗凝剂,离心收集沉淀;将沉淀用生理盐水冲洗,离心,去除血红蛋白;去离子水等倍体积搅拌溶血;向溶血液中加入等倍体积95%预冷乙醇,0.2倍体积的预冷氯仿;搅拌,离心,取上清;上清加热到60℃,保温15分钟,然后速降至室温,离心,取上清;生理盐水中冷却,加入预冷丙酮,搅拌,取沉淀,用去离子水溶解;脱盐层析;沉淀用HAC-NaAC溶液清洗2次后用PBS溶液重溶,再通过0.45um的滤纸过滤;离子交换层析;超滤;SOD洗脱液在4℃的条件下离心,取上清,即为SOD原液。本发明的方法操作简单,提取的超氧化物歧化酶纯度高。