兔血中超氧化物歧化酶的纯化制备方法
基本信息
申请号 | CN201510407291.0 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN105039273A | 公开(公告)日 | 2015-11-11 |
申请公布号 | CN105039273A | 申请公布日 | 2015-11-11 |
分类号 | C12N9/02(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 张姝倩;葛安山;孙莎莎;陈宴霞;宋玉龙 | 申请(专利权)人 | 青岛中创生物科技有限公司 |
代理机构 | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人 | 青岛康大食品有限公司;青岛中创生物科技有限公司 |
地址 | 266500 山东省青岛市黄岛区滨海大道8399号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明属于生物蛋白技术领域,具体涉及兔血中超氧化物歧化酶的纯化制备方法。该方法主要包括如下工艺步骤:将兔血中加入抗凝剂,离心收集沉淀;将沉淀用生理盐水冲洗,离心,去除血红蛋白;去离子水等倍体积搅拌溶血;向溶血液中加入等倍体积95%预冷乙醇,0.2倍体积的预冷氯仿;搅拌,离心,取上清;上清加热到60℃,保温15分钟,然后速降至室温,离心,取上清;生理盐水中冷却,加入预冷丙酮,搅拌,取沉淀,用去离子水溶解;脱盐层析;沉淀用HAC-NaAC溶液清洗2次后用PBS溶液重溶,再通过0.45um的滤纸过滤;离子交换层析;超滤;SOD洗脱液在4℃的条件下离心,取上清,即为SOD原液。本发明的方法操作简单,提取的超氧化物歧化酶纯度高。 |
