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一种尿蛋白制备方法及尿蛋白质组的检测方法

基本信息

申请号	CN201710048099.6	申请日	-
公开（公告）号	CN108333263A	公开（公告）日	2018-07-27
申请公布号	CN108333263A	申请公布日	2018-07-27
分类号	G01N30/02;G01N30/06	分类	测量；测试;
发明人	秦钧;冷文川;倪晓天;路天元;甄蓓;王广舜;孙长青;钟博文	申请（专利权）人	北京松果天目健康管理有限公司
代理机构	北京骥驰知识产权代理有限公司	代理人	北京蛋白质组研究中心;北京松果天目健康管理有限公司
地址	102206 北京市昌平区生命科学园38号
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种尿蛋白质组的检测方法，包括尿蛋白的制备、在蛋白或肽水平的分离、质谱鉴定，其特征在于，所述尿蛋白制备方法包括下面步骤(1)将尿液样品在常温下超速离心一段时间，弃去上清液，保留沉淀；(2)向步骤(1)所述的沉淀中加入适量的重悬缓冲液使沉淀重悬；(3)向步骤(2)所得的重悬液中加入能打开二硫键的还原剂，于37‑80℃温度下加热10‑60分钟；(4)向步骤(3)所得的溶液中添加清洗缓冲液，然后高速离心一段时间，弃去上清，保留沉淀；(5)用消化缓冲液重新溶解步骤(4)所得的沉淀，之后进行蛋白的溶液内酶解，或用一维电泳(SDS‑PAGE)进行蛋白分离。本发明方法简化了尿蛋白的制备过程、提高了检测的准确性和重复性，并且可用于高通量定量深度尿蛋白质组检测。