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凝血因子Ⅹ激活剂活性标定的方法

基本信息

申请号	CN201611037433.X	申请日	-
公开（公告）号	CN108089006B	公开（公告）日	2018-05-29
申请公布号	CN108089006B	申请公布日	2018-05-29
分类号	C12Q1/37(2006.01)I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	郝鹏飞;冯彩丽;谭淑萍	申请（专利权）人	北京诺维康医药科技有限公司
代理机构	北京银龙知识产权代理有限公司	代理人	舒泰神（北京）生物制药股份有限公司;北京诺维康医药科技有限公司
地址	100176北京市大兴区北京市经济技术开发区经海二路36号
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种凝血因子Ⅹ激活剂活性标定的方法，属于生物技术领域。步骤如下：(1)在酶标板中加入凝血因子Ⅹ、生色底物溶液和具有确定稀释倍数的待标样品，所述凝血因子X浓度为22.5μg/ml～27.5μg/ml，所述生色底物溶液为4.5mg/ml～5.5mg/ml生色底物溶液与CaCl2溶液按4:3体积比混匀的溶液，所述凝血因子Ⅹ、生色底物溶液和待标样品体积比为30:23:7，同一样品至少设置2个复孔；(2)将酶标板置于酶标仪中读取OD值；(3)取4～15min反应时段的OD值，将复孔的OD平均值与反应时间的平方做线性回归，得到反应曲线；(4)选择反应曲线斜率，定义活性单位，乘以待标样品的稀释倍数，得到待标样品的活性。本发明操作简单，反应速率稳定，标定精度和准确度高。