一种可溶性表达人脑利钠肽重组蛋白的方法和应用
基本信息
申请号 | CN201410139968.2 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN103923937A | 公开(公告)日 | 2014-07-16 |
申请公布号 | CN103923937A | 申请公布日 | 2014-07-16 |
分类号 | C12N15/70(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C07K14/575(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I;C07K1/20(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I;A61K38/22(2006.01)I;A61P9/04(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 邹卫;张世光;周晓雷;宋浩雷;延志芬 | 申请(专利权)人 | 石家庄沃泰生物科技有限公司 |
代理机构 | 苏州威世朋知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人 | 杨林洁;东楠 |
地址 | 050000 河北省石家庄市桥西区中山西路168号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明提供了一种可溶性表达人脑利钠肽(HumanBrainNatriureticPeptide,hBNP)重组蛋白的方法,包括如下步骤:1)获得重组基因:获得表达人脑利钠肽重组蛋白的重组基因His-DsbAmut-BNP,所述重组基因的序列包括5’至3’方向依次排列的纯化标签基因序列、分子伴侣蛋白基因序列、蛋白酶识别位点序列和人脑利钠肽基因序列;2)获得重组质粒:将上一步获得的重组基因插入载体质粒,获得含有重组基因的重组质粒;3)获得基因工程菌:将上一步获得的重组质粒转化宿主细胞获得基因工程菌;4)表达外源基因:基因工程菌发酵,表达含有重组人脑利钠肽的融合蛋白;5)纯化目的蛋白:裂解菌体,收集融合蛋白,通过蛋白酶酶切去除分子伴侣、层析纯化步骤获得重组人脑利钠肽重组蛋白。 |
