一种可溶性表达人脑利钠肽重组蛋白的方法和应用

基本信息

申请号 CN201410139968.2 申请日 -
公开(公告)号 CN103923937A 公开(公告)日 2014-07-16
申请公布号 CN103923937A 申请公布日 2014-07-16
分类号 C12N15/70(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C07K14/575(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I;C07K1/20(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I;A61K38/22(2006.01)I;A61P9/04(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 邹卫;张世光;周晓雷;宋浩雷;延志芬 申请(专利权)人 石家庄沃泰生物科技有限公司
代理机构 苏州威世朋知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 杨林洁;东楠
地址 050000 河北省石家庄市桥西区中山西路168号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种可溶性表达人脑利钠肽(HumanBrainNatriureticPeptide,hBNP)重组蛋白的方法,包括如下步骤:1)获得重组基因:获得表达人脑利钠肽重组蛋白的重组基因His-DsbAmut-BNP,所述重组基因的序列包括5’至3’方向依次排列的纯化标签基因序列、分子伴侣蛋白基因序列、蛋白酶识别位点序列和人脑利钠肽基因序列;2)获得重组质粒:将上一步获得的重组基因插入载体质粒,获得含有重组基因的重组质粒;3)获得基因工程菌:将上一步获得的重组质粒转化宿主细胞获得基因工程菌;4)表达外源基因:基因工程菌发酵,表达含有重组人脑利钠肽的融合蛋白;5)纯化目的蛋白:裂解菌体,收集融合蛋白,通过蛋白酶酶切去除分子伴侣、层析纯化步骤获得重组人脑利钠肽重组蛋白。