干细胞高效表达目的蛋白的制备方法和应用方法
基本信息
| 申请号 | CN202010295429.3 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN111440821A | 公开（公告）日 | 2020-07-24 |
| 申请公布号 | CN111440821A | 申请公布日 | 2020-07-24 |
| 分类号 | C12N15/85(2006.01)I | 分类 | - |
| 发明人 | 刘荣坤;刘芳;岳绪娥 | 申请（专利权）人 | 北京本真工坊生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 北京汇信合知识产权代理有限公司 | 代理人 | 王维新 |
| 地址 | 102206北京市昌平区生命园路9号院博晖创新大厦四层东区 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种干细胞高效表达目的蛋白的制备方法和应用方法，其中制备方法包括：从人体组织中分离干细胞并进行培养；结合PB转座子、EF1A启动子序列、KOZAK序列、所要表达的目的蛋白序列、T2A序列、所要表达目的蛋白序列、CD33信号肽序列、IRES序列、PURO序列和附加体系统，构建重组表达载体；将重组表达载体加入干细胞的培养悬液，采用电转染方式获得能够表达目的蛋白的干细胞。通过本发明的技术方案，可以将重组表达载体转移至干细胞中，迅速获得高表达的细胞，可以增加两种细胞因子的协同作用，使两种细胞因子同时表达，使重组表达载体质粒在干细胞内长时间存在并高效表达目的蛋白。 |
