α-淀粉酶的制备方法

基本信息

申请号 CN201610836135.0 申请日 -
公开(公告)号 CN106566820B 公开(公告)日 2019-07-16
申请公布号 CN106566820B 申请公布日 2019-07-16
分类号 C12N9/28;C12N15/77 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 刘秀霞;张伟;白仲虎;杨艳坤;李诗洁;王世杰 申请(专利权)人 深圳市小分子新药创新中心有限公司
代理机构 无锡盛阳专利商标事务所(普通合伙) 代理人 顾吉云
地址 518110 广东省深圳市龙华区观澜街道新澜社区观光路1301-76号银星智界二期1号楼A1501
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了α‑淀粉酶的制备方法,其能解决现有技术中通过枯草芽孢杆菌制备α‑淀粉酶后期纯化步骤繁琐、得到纯品不易的技术问题。其包括以下步骤:(2)在α‑淀粉酶基因上游添加e3 SD序列、下游添加组氨酸标签,获得改造后的α‑淀粉酶基因;(3)将改造后的α‑淀粉酶基因连接到载体pxmj19‑aph213上,获得重组表达载体pxmj19‑aph213‑amy;(4)将重组表达载体pxmj19‑aph213‑amy转入谷氨酸棒杆菌,获得重组菌;(5)培养重组菌,分泌表达α‑淀粉酶;(6)α‑淀粉酶的纯化,包括:将含有α‑淀粉酶的上清进行亲和层析,介质为镍柱。