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一种检测VEGF靶向治疗药物生物学活性的方法

基本信息

申请号	CN201911347878.1	申请日	-
公开（公告）号	CN110964745A	公开（公告）日	2020-04-07
申请公布号	CN110964745A	申请公布日	2020-04-07
分类号	C12N15/85;C12N15/53;C12Q1/02;C12Q1/66	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	叶才果;何婉玲;王笑非	申请（专利权）人	广东安普泽生物医药股份有限公司
代理机构	广州新诺专利商标事务所有限公司	代理人	刘婉
地址	528231 广东省佛山市南海区321国道仙溪段广东生物医药产业基地一期B栋六楼
法律状态	-

摘要

本发明提供了一种检测VEGF靶向治疗药物生物学活性的方法，其包括以下步骤：构建编码KDR‑NGFR融合蛋白的核苷酸序列，将其进行全长克隆到空白载体中，转染第一细胞，用杀稻瘟菌素杀死未稳定转染的细胞，在杀稻瘟菌素下正常生长的细胞为第二细胞；构建转录因子NF‑kB重组结合序列，然后将其克隆到荧光素酶报告基因载体中，转染第二细胞，用杀稻瘟菌素和嘌呤霉素杀死未稳定转染的细胞，在杀稻瘟菌素和嘌呤霉素下正常生长的细胞为第三细胞；接种第三细胞，加入VEGF靶向治疗药物和VEGF，培养细胞；裂解细胞，加入荧光素酶的底物，检测荧光强度，以确定所述VEGF靶向治疗药物阻断VEGF的生物学活性。本发明的方法能准确、简单易行、快速检测VEGF靶向药物的生物学活性。