基于不对称AS2-PCR的基因变异检测方法及引物
基本信息
申请号 | CN201510654829.8 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN106566871A | 公开(公告)日 | 2017-04-19 |
申请公布号 | CN106566871A | 申请公布日 | 2017-04-19 |
分类号 | C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 黄新华;戴慧清;李冰 | 申请(专利权)人 | 上海基致生物医药科技有限公司 |
代理机构 | 上海浦一知识产权代理有限公司 | 代理人 | 丁纪铁 |
地址 | 201318 上海市浦东新区天雄路199号1幢第三层C区和第四层C区 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种基于不对称AS2‑PCR的基因变异检测方法,步骤包括:1)提取样本DNA;2)扩增待测基因片段;3)将扩增产物加到不对称AS2‑PCR反应体系中,进行PCR扩增反应和探针外切反应;所述AS2‑PCR反应体系含有2条带荧光标记的通用标签信号探针、2条正向引物、1条反向引物、有外切活性的聚合酶和PCR缓冲液;4)检测反应的荧光信号,计算两个通道的Ct差值,并根据Ct差值判断待测基因SNP。本发明还公开了用于上述方法的不对称AS2‑PCR寡核苷酸引物组及其用途。本发明通过设计不对称AS2‑PCR的引物,克服了传统AS2‑PCR假阳性率高的问题,提高了基因变异检测的准确性。 |
