基于不对称AS2-PCR的基因变异检测方法及引物

基本信息

申请号 CN201510654829.8 申请日 -
公开(公告)号 CN106566871A 公开(公告)日 2017-04-19
申请公布号 CN106566871A 申请公布日 2017-04-19
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 黄新华;戴慧清;李冰 申请(专利权)人 上海基致生物医药科技有限公司
代理机构 上海浦一知识产权代理有限公司 代理人 丁纪铁
地址 201318 上海市浦东新区天雄路199号1幢第三层C区和第四层C区
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种基于不对称AS2‑PCR的基因变异检测方法,步骤包括:1)提取样本DNA;2)扩增待测基因片段;3)将扩增产物加到不对称AS2‑PCR反应体系中,进行PCR扩增反应和探针外切反应;所述AS2‑PCR反应体系含有2条带荧光标记的通用标签信号探针、2条正向引物、1条反向引物、有外切活性的聚合酶和PCR缓冲液;4)检测反应的荧光信号,计算两个通道的Ct差值,并根据Ct差值判断待测基因SNP。本发明还公开了用于上述方法的不对称AS2‑PCR寡核苷酸引物组及其用途。本发明通过设计不对称AS2‑PCR的引物,克服了传统AS2‑PCR假阳性率高的问题,提高了基因变异检测的准确性。