基于分子标签和二代测序降低测序错误的测序方法、试剂盒及其应用

基本信息

申请号 CN201810067545.2 申请日 -
公开(公告)号 CN108148900A 公开(公告)日 2018-06-12
申请公布号 CN108148900A 申请公布日 2018-06-12
分类号 C12Q1/6869 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 于丹;姚旭梅;涂小年;李小花;刘朝煜 申请(专利权)人 深圳因合生物科技有限公司
代理机构 深圳市徽正知识产权代理有限公司 代理人 深圳因合生物科技有限公司;深圳因和生物科技有限公司
地址 518000 广东省深圳市前海深港合作区前湾一路1号A栋201室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种基于分子标签和二代测序降低测序错误的测序方法、试剂盒以及其应用,测序方法包括:S1.针对每个样本合成4‑16种含有不同固定特异序列标签的接头的正链P5和反链P7,将P5和P7退火,形成Y字型接头;S2.将模板DNA末端补平,并在3’端添加A碱基;S3.将Y字型接头连接到处理后的模板DNA两端;S4.回收连接上接头的模板DNA,并用带有样本标签的接头引物对模板DNA进行富集扩增;S5.回收经富集扩增的产物;S6.对富集扩增产物进行二代测序。本发明方法可有效识别双链DNA原始模板中的突变,尤其是不对称突变,因而可有效识别从第一次富集扩增开始引入的扩增错误,在Illumina单端和双端样本标签测序模式下,通过样本独有的4‑16种接头的固定特异序列,可有效解决样本标签漂移问题。