翻译组RNC-mRNAs文库构建方法

基本信息

申请号 CN201610534365.1 申请日 -
公开(公告)号 CN106434625B 公开(公告)日 2020-12-11
申请公布号 CN106434625B 申请公布日 2020-12-11
分类号 C12N15/10;C12Q1/6806;C40B50/06 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 伍泳彰;曾宏彬;陈杰 申请(专利权)人 广州赛哲生物科技股份有限公司
代理机构 广州圣理华知识产权代理有限公司 代理人 顿海舟;李唐明
地址 510300 广东省广州市国际生物岛螺旋四路一号研发A区第三层304-305
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及一种翻译组RNC‑mRNAs文库构建方法。该构建方法包括RNC‑mRNAs和mRNA准备,合成双链cDNA,RNC‑mRNAs和mRNA文库构建,数据质控与分析。本发明的方法在RNC捕获上,采用了先进的Beckman MAX‑TL超速离心平台,在cDNA合成和文库构建上,首先采用金属离子高温物理法对RNA片段化,后续才进行cDNA合成、末端修复和磁珠片段选择,增加RNC‑mRNAs信息的完整性、均一性,双引物逆转录法,此法大大提高了酶的效率,保证全长扩增的完整。在6个小时内,可以实现从RNC捕获到翻译组文库构建整套流程。