一种蛋白质凝胶样品的质谱检测前处理方法及处理试剂盒
基本信息
申请号 | CN202010578728.8 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN111721939A | 公开(公告)日 | 2020-09-29 |
申请公布号 | CN111721939A | 申请公布日 | 2020-09-29 |
分类号 | G01N33/68(2006.01)I | 分类 | 测量;测试; |
发明人 | 尚骏;陈希;刘宜子;陈继锋;许梦玲;韩强强;杜博贾 | 申请(专利权)人 | 谱度众合(武汉)生命科技有限公司 |
代理机构 | 武汉臻诚专利代理事务所(普通合伙) | 代理人 | 谱度众合(武汉)生命科技有限公司 |
地址 | 430070湖北省武汉市洪山区高新大道666号光谷生物园B5栋 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种蛋白质凝胶样品的质谱检测前处理方法及处理试剂盒。所述方法包括(1)胶内酶解:将蛋白质凝胶电泳的待检测泳道部分细碎化后,经洗涤、蛋白质还原处理、蛋白质烷基化处理、蛋白酶酶解处理后,采用酸性乙腈溶液进行肽段抽提,获得肽段‑酸性乙腈溶液;(2)肽段脱盐:将肽段‑乙腈溶液,转移至填充有具有阳离子交换作用的反相色谱填料的分离柱,采用质量分数0.1%‑0.5%的三氟乙酸进行脱盐洗涤,并采用碱性乙腈溶液洗脱,收集含有肽段的洗脱液,作为质谱检测进样样品。所述包括:肽段抽提液、脱盐清洗液、以及脱盐洗脱液。本发明降低了对实验条件的要求,并且缩短样品制备时间至一半左右。 |
