生产利妥昔单抗的高表达、高稳定性CHO细胞株及其构建方法

基本信息

申请号 CN201710087562.8 申请日 -
公开(公告)号 CN108456660A 公开(公告)日 2018-08-28
申请公布号 CN108456660A 申请公布日 2018-08-28
分类号 C12N5/10;C12N15/13;C12N15/85;C07K16/28 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 沈彬彬;王蕙文;吴幼玲 申请(专利权)人 浙江特瑞思药业股份有限公司
代理机构 上海一平知识产权代理有限公司 代理人 浙江特瑞思药业股份有限公司
地址 313000 浙江省湖州市红丰路1366号南太湖科创中心5幢3层
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种生产利妥昔单抗的高表达、高稳定性CHO细胞株及其构建方法。具体地本发明利用经悬浮驯化的CHO‑K1作为宿主细胞,构建单克隆抗体轻链(Light Chain,LC)pcDNA3‑RX‑Neo和重链(Heavy Chain,HC)pcDNA3‑RX‑GS双表达质粒,稳定转染外源双质粒,经双筛选标记筛选、基因扩增和对基因扩增后细胞系进行筛选,得到了适合无血清悬浮培养的、稳定的、高效表达利妥昔单抗的TRS001细胞株D3G6C11。其产量在1.7‑2.2g/L之间,为大规模产业化制备利妥昔单抗奠定了良好基础。