生产利妥昔单抗的高表达、高稳定性CHO细胞株及其构建方法
基本信息
申请号 | CN201710087562.8 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN108456660A | 公开(公告)日 | 2018-08-28 |
申请公布号 | CN108456660A | 申请公布日 | 2018-08-28 |
分类号 | C12N5/10;C12N15/13;C12N15/85;C07K16/28 | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 沈彬彬;王蕙文;吴幼玲 | 申请(专利权)人 | 浙江特瑞思药业股份有限公司 |
代理机构 | 上海一平知识产权代理有限公司 | 代理人 | 浙江特瑞思药业股份有限公司 |
地址 | 313000 浙江省湖州市红丰路1366号南太湖科创中心5幢3层 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明提供了一种生产利妥昔单抗的高表达、高稳定性CHO细胞株及其构建方法。具体地本发明利用经悬浮驯化的CHO‑K1作为宿主细胞,构建单克隆抗体轻链(Light Chain,LC)pcDNA3‑RX‑Neo和重链(Heavy Chain,HC)pcDNA3‑RX‑GS双表达质粒,稳定转染外源双质粒,经双筛选标记筛选、基因扩增和对基因扩增后细胞系进行筛选,得到了适合无血清悬浮培养的、稳定的、高效表达利妥昔单抗的TRS001细胞株D3G6C11。其产量在1.7‑2.2g/L之间,为大规模产业化制备利妥昔单抗奠定了良好基础。 |
