一种己糖激酶的制备方法

基本信息

申请号 CN202111319332.2 申请日 -
公开(公告)号 CN113846072A 公开(公告)日 2021-12-28
申请公布号 CN113846072A 申请公布日 2021-12-28
分类号 C12N9/12(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 罗漫杰;宫安;王梁;施婧妮;徐灿;彭晶 申请(专利权)人 武汉瀚海新酶生物科技有限公司
代理机构 上海旭诚知识产权代理有限公司 代理人 郑立
地址 430000湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道666号武汉国家生物产业(九峰创新)基地B5栋
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种己糖激酶表达及纯化方法,包括己糖激酶基因的克隆与分子构建、重组表达菌株的构建、重组己糖激酶的诱导表达、纯化与活力检测方法和己糖激酶高密度发酵放大等步骤。本发明第一次从酿酒酵母中克隆己糖激酶基因重组在大肠杆菌中表达,大大的提高了蛋白表达量和降低了蛋白纯化的难度,极大地简化了己糖激酶生产工艺;在实现己糖激酶的高效稳定表达的同时,通过优化诱导温度、诱导剂浓度、和诱导添加Mg2+浓度等提高了己糖激酶的蛋白比活力。