免提取直接扩增的人MTHFR基因SNP分型快速试纸条检测方法

基本信息

申请号 CN201611052973.5 申请日 -
公开(公告)号 CN106498074A 公开(公告)日 2017-03-15
申请公布号 CN106498074A 申请公布日 2017-03-15
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 张朝;崔亚丽;朱娟莉;惠文利;张秦鲁;魏华;刘克武 申请(专利权)人 金磁(苏州)纳米科技有限公司
代理机构 常州佰业腾飞专利代理事务所(普通合伙) 代理人 黄杭飞
地址 215163 江苏省苏州市高新区锦峰8号11号楼一、二、三层
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种免提取直接扩增的人MTHFR基因SNP分型快速试纸条检测方法,包括如下步骤:步骤一、将样本与样本处理液混合并静置5分钟,作为模版使用;步骤二、针对待检测MTHFR基因C677T SNP位点,分别设计一条野生型特异性引物、一条突变型特异性引物和一条共用引物进行识别与扩增;在野生型特异性引物和突变型特异性引物的5′端均标记地高辛,共用引物的5′端标记生物素;步骤三、针对每一个样本,平行做两管PCR反应,获得扩增产物;步骤四、采用层析技术并以地高辛和地高辛单抗作用、生物素和链亲和素作用,对步骤三得到的扩增产物进行试纸条分型检测,判读基因型。