一种不依赖VB12的聚球藻PCC 7002工程菌及其构建方法和应用

基本信息

申请号 CN201910305057.5 申请日 -
公开(公告)号 CN110172432A 公开(公告)日 2019-08-27
申请公布号 CN110172432A 申请公布日 2019-08-27
分类号 C12N1/21;C12N15/74;C12N15/54;C12N15/90;C12R1/01 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 王军 申请(专利权)人 深圳市奥极因科技有限公司
代理机构 合肥市长远专利代理事务所(普通合伙) 代理人 深圳市奥极因科技有限公司
地址 518000 广东省深圳市南山区粤海街道软件产业基地4栋A座1102室6区3号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种不依赖VB12的聚球藻PCC 7002工程菌及其构建方法和应用,涉及基因工程技术领域,是通过同源重组实现外源基因的插入,将聚球藻PCC 7002中的A2746上游的同源臂基因片段、聚球藻PCC 7002的cpcBA启动子基因、目的蛋白表达基因、钴胺素非依赖型甲硫氨酸合成酶基因metE、聚球藻PCC 7002中的A2746下游的同源臂基因片段依次连接到pAQ1质粒上,得到载体Q29;将Q29载体转化到聚球藻PCC 7002,获得不依赖VB12的聚球藻PCC 7002工程菌。本发明利用基因工程在PCC 7002菌株中导入了metE基因的重组质粒,获得在不添加VB12的条件下生长,且菌株表达蛋白使得细菌自动沉降的不依赖VB12的聚球藻PCC 7002工程菌,可用于借助聚球藻表达的各种外源蛋白的表达。