用于表达限制性内切酶KasI的甲基化保护菌株的筛选方法专利查询专利号|摘要-满商公司网

用于表达限制性内切酶KasI的甲基化保护菌株的筛选方法

基本信息

申请号	CN201910969528.2	申请日	-
公开（公告）号	CN110643558A	公开（公告）日	2020-01-03
申请公布号	CN110643558A	申请公布日	2020-01-03
分类号	C12N1/21;C12N15/70;C12Q1/689;C12Q1/10;C12R1/19	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	张坤晓;许恒皓;葛绍勇;李伦;韩挺翰	申请（专利权）人	莫纳（连云港）生物科技有限公司
代理机构	连云港润知专利代理事务所	代理人	莫纳（连云港）生物科技有限公司;江苏海洋大学
地址	222000 江苏省连云港市高新区花果山大道17号科技创业城1号楼13-14层
法律状态	-

摘要

本发明是一种用于表达限制性内切酶KasI的甲基化保护菌株的筛选方法，该方法从菌株Haemophilus haemolyticus的基因组中使用甲基转移酶M.HhaI基因的特异性引物获得了甲基转移酶M.HhaI的基因；再经构建甲基转移酶M.HhaI的重组表达菌株，筛选、构建限制性内切酶KasI的重组表达菌株，最后重组表达质粒pBAD‑R.KasI转化感受态细胞进行筛选培养，获得限制酶KasI的重组表达菌株。本发明方法实现了限制酶KasI的高效重组表达；利用阿拉伯糖操纵子表达系统进行限制酶KasI的重组表达；抵抗限制酶KasI对宿主基因组DNA的酶切，筛选出的M.HhaI甲基化保护菌株同样可应用于其他具有类似识别位点的限制酶的重组表达。