一种利用甲基化酶的保护高效重组表达限制性内切酶的方法

基本信息

申请号 CN201611048568.6 申请日 -
公开(公告)号 CN106480076B 公开(公告)日 2020-01-24
申请公布号 CN106480076B 申请公布日 2020-01-24
分类号 C12N15/55;C12N15/70;C12N9/22 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 高嵩;尹欣;王佩;陈凯;韩挺翰;孙峰;许恒皓 申请(专利权)人 莫纳(连云港)生物科技有限公司
代理机构 连云港润知专利代理事务所 代理人 莫纳(连云港)生物科技有限公司
地址 222000 江苏省连云港市海州区花果山大道17号科技创业城1号楼13-14层
法律状态 -

摘要

摘要 本发明是一种利用甲基化酶的保护高效重组表达限制性内切酶的方法,其特征在于:所述的甲基化酶是M.Sss I;所述限制性内切酶D选自:AatII、AciI、AclI、AfeI、AgeI、AscI、AsiSI、AvaI、BceAI、BmgBI、BsaAI、BsaHI、BsiEI、BsiWI、BsmBI、BspDI、BspEI、BsrFI、BssHII、BstBI、BstUI、BtgZI、ClaI、EagI、FauI、FseI、FspI、HaeII、HgaI、HhaI、HinP1I、HpaII、Hpy99I、HpyCH4IV、KasI、MluI、NaeI、NarI、NgoMIV、NotI、NruI、Nt.BsmAI、Nt.CviPII、PaeR7I、PluTI、PmlI、PvuI、RsrII、SacII、SalI、SfoI、SgrAI、SmaI、SnaBI、TliI、TspMI、XhoI、XmaI、ZraI。本发明方法重组工程菌的构建过程中直接使用广谱保护型甲基化酶M.Sss I,无需针对单个限制性内切酶进行繁琐的甲基化酶基因筛选,应用范围广泛,大大简化了重组表达过程。