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一种基于数字PCR平台的EGFR基因扩增的检测方法

基本信息

申请号	CN202011458578.3	申请日	-
公开（公告）号	CN112430646A	公开（公告）日	2021-03-02
申请公布号	CN112430646A	申请公布日	2021-03-02
分类号	C12Q1/6851;C12N15/11	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	杨春燕;段小红;杨文娟;丁蕊;张腾龙;周启明	申请（专利权）人	南京求臻基因科技有限公司
代理机构	重庆百润洪知识产权代理有限公司	代理人	姚琼斯
地址	210000 江苏省南京市江北新区浦滨路211号扬子科创中心一期A栋9楼
法律状态	-

摘要

本发明涉及分子生物学技术领域，尤其是指一种基于数字PCR平台的EGFR基因扩增的检测方法，包括如下步骤：S1，cfDNA的提取：提取待测样本的cfDNA，所述待测样本为全血样本；S2，制备数字PCR反应混合液：将待测样本cfDNA模板、EGFR基因扩增区域正向和反向扩增引物、EGFR基因扩增区域TaqMan探针、内参基因EFTUD2正向和反向扩增引物、内参基因EFTUD2标记TaqMan探针以及ddPCR反应预混液混合，制备得到数字PCR反应混合液，所述cfDNA模板的含量为0.5～2ng/μL；S3，将步骤S2中得到的PCR反应混合液加载到数字PCR芯片中，进行ddPCR扩增反应；S4，PCR芯片荧光信号读取；S5，数据分析和结果统计。本发明灵敏度高，操作简单，无需采集组织标本，有效减少了病人的痛苦，特别适合对组织取样不耐受的患者。