新型基因打靶方法
基本信息
申请号 | CN201510220631.9 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN106191041A | 公开(公告)日 | 2016-12-07 |
申请公布号 | CN106191041A | 申请公布日 | 2016-12-07 |
分类号 | C12N15/11(2006.01)I;C12N1/16(2006.01)I;C12P21/00(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 姜有为;李云飞 | 申请(专利权)人 | 杭州菁因康生物科技有限公司 |
代理机构 | 上海一平知识产权代理有限公司 | 代理人 | 杭州菁因康生物科技有限公司 |
地址 | 311121 浙江省杭州市余杭区文一西路1500号1幢524室 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明提供一种新型的两步基因打靶方法以及用于基因打靶的核苷酸构建物,所述方法能提高基因打靶效率和精确鉴定靶基因敲除株。本发明方法包括首先通过同源重组用打靶盒高效替换基因组中的靶基因,所述打靶盒由靶基因活性变异体、标记基因和位点特异性重组位点构成。然后通过重组酶切除打靶盒,在靶基因上留下一个位点特异性重组位点而产生靶基因敲除株。本发明还包括利用重组酶表达载体中的反选择标记除去敲除株中的重组酶表达载体。本发明方法可以利用所有机体细胞中内源性的同源重组过程,因此,可以用于改造机体的任何基因。 |
