一种重组人粒细胞集落刺激因子的制备方法
基本信息
| 申请号 | CN201310150982.8 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN104120159A | 公开（公告）日 | 2014-10-29 |
| 申请公布号 | CN104120159A | 申请公布日 | 2014-10-29 |
| 分类号 | C12P21/02(2006.01)I;C07K14/53(2006.01)I;C07K1/16(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 岑仡;宋宏 | 申请（专利权）人 | 上海三维生物技术有限公司 |
| 代理机构 | 上海新天专利代理有限公司 | 代理人 | 上海三维生物技术有限公司 |
| 地址 | 上海市浦东新区金桥出口加工区桂桥路1150号C座 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明涉及一种重组人粒细胞集落刺激因子的制备方法，包括：对rhG-CSF基因工程菌进行发酵培养，然后将培养菌体混悬于裂解液中，制得包涵体；将包涵体进行变性处理，然后用柱层析进行复性，得rhG-CSF复性液；最后进行阳离子层析和凝胶过滤层析，收集得到重组人粒细胞集落刺激因子。采用柱层析复性的方法，简化了操作方式，使重组人粒细胞集落刺激因子的复性收率高于70%；复性液经过阳离子交换和分子筛层析后制备成rhG-CSF的原液。原液电泳纯度达到99%以上，RP-HPLC的纯度达到98%以上，比活性6.6×107IU/mg。 |
