一种体外扩增外周血NK的方法
基本信息
| 申请号 | CN202111617589.6 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN114438028A | 公开（公告）日 | 2022-05-06 |
| 申请公布号 | CN114438028A | 申请公布日 | 2022-05-06 |
| 分类号 | C12N5/0783（2010.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 寇大莲;黄雨;钟文英;王晗;幸倚帆;程威 | 申请（专利权）人 | 成都康景生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 北京中索知识产权代理有限公司 | 代理人 | 唐亭 |
| 地址 | 610000四川省成都市温江区芙蓉大道二段733号三医创新中心（三期）9栋第1、2层 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种体外扩增外周血NK的方法，其采用的NK完全培养基中包括以下组分：250～1000IU/ml的IL‑2、10～500ng/ml的IL‑15、10～500ng/ml的IL‑21、2～20ug/ml的肽聚糖、5％～10％的灭活自体血浆；所述NK完全培养基以贝索基础培养基为基液，在基液中加入IL‑2、IL‑15、IL‑21、肽聚糖、灭活自体血浆，形成NK完全培养基。将新鲜血液离心分离，吸取上层淡黄色血浆于离心管，56℃水浴30min灭活，然后离心去除沉淀，将上层血浆转移至新的离心管置于4℃冰箱保存备用；下层血细胞层用于提取PBMC；将获取的PBMC以NK完全培养基进行重悬，并将浓度调整至1～2×106cells/ml，接种于75cm2培养瓶中混合，置于37℃，5％CO2培养箱中培养。本发明所培养NK数量可扩增170倍左右，而NK纯度更是高达97％以上，远超行业水平。 |
