一种基于gp120/CCR5阻断功能及其生物效应的药物快速筛选方法专利查询专利号|摘要-满商公司网

一种基于gp120/CCR5阻断功能及其生物效应的药物快速筛选方法

基本信息

申请号	CN201811653600.2	申请日	-
公开（公告）号	CN109652454B	公开（公告）日	2021-06-22
申请公布号	CN109652454B	申请公布日	2021-06-22
分类号	C12N15/867;C12N5/10;C12Q1/02;C12R1/91	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	范春雷	申请（专利权）人	杭州迈尔德生物科技有限公司
代理机构	北京工信联合知识产权代理有限公司	代理人	商琛
地址	310052 浙江省杭州市滨江区长河街道滨安路688号2幢C楼2层218室
法律状态	-

摘要

本发明建立了一种基于gp120/CCR5阻断功能及其生物效应的药物快速筛选方法：将红色荧光蛋白tagRFP偶联于gp120蛋白羧基末端（C端），构建真核表达载体，并制备gp120‑tagRFP融合蛋白；将人源CD4蛋白基因构建在CMV启动子下；将人源CCR5基因构建在CMV启动子下游，将绿色荧光蛋白基因d2EGFP构建在NF‑κB RE‑TATA‑like人工复合调控元件的下游，两者构建于同一个慢病毒载体内；并建立新型的稳转细胞系CD4.CCR5.CCR5.NF‑κBR‑d2EGFP/Jurkat；以gp120‑tagRFP与细胞系的亲和进行荧光检测筛选阻断剂。本方法可精确反映抗CCR5药的效应，并可同时获得阻断功能与CC趋化因子/CCR5信号通路的生物学效应数据，构建了快速筛选抗CCR5药物和评估其生物学效应的实验模型。