一种重组葡激酶突变体纯化制备工艺

基本信息

申请号 CN202110971214.3 申请日 -
公开(公告)号 CN113416722A 公开(公告)日 2021-09-21
申请公布号 CN113416722A 申请公布日 2021-09-21
分类号 C12N9/52(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 田赵源;范敏;陆游;于东安;游猛;谭小钉;梅菲;王宇;钱子俊 申请(专利权)人 江苏迈威康新药研发有限公司
代理机构 - 代理人 -
地址 201210上海市浦东新区李冰路576号(创想园)3号楼4楼
法律状态 -

摘要

摘要 本公开提供一种重组葡激酶突变体纯化制备工艺,其包括步骤1工程菌菌体匀浆及匀浆液处理,步骤2重组蛋白的捕获,以及步骤3离子交换层析色谱精制;其中所述步骤2重组蛋白的捕获是将工程菌菌体匀浆处理液上样至镍亲和柱,通过改变咪唑浓度洗脱目的蛋白,同时加入0.3mol/L NaCl来减少由于电荷作用引起的非特异性吸附。所述方法重复性好、得率高,能获得纯度接近100%的葡激酶,适合制药工业大规模生产。