酶学性能改善的甲基对硫磷水解酶突变体及其应用

基本信息

申请号 CN201710505744.2 申请日 -
公开(公告)号 CN107189993B 公开(公告)日 2019-08-13
申请公布号 CN107189993B 申请公布日 2019-08-13
分类号 C12N9/16;C12N15/55;A62D3/02;A62D101/04;A62D101/28 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 龚晓洁;李立公;李光雷 申请(专利权)人 北京森根比亚生物工程技术有限公司
代理机构 北京思元知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 北京森根比亚生物工程技术有限公司
地址 101407 北京市怀柔区雁栖经济开发区雁栖河西一路6号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了酶学性能改善的甲基对硫磷水解酶突变体及其应用。本发明对野生型甲基对硫磷水解酶进行定点改造,结合蛋白结构计算、模拟技术和分子生物学技术对OPHC2进行体外突变和表达,并运用生物化学手段检测蛋白酶的动力学参数和稳定性,筛选获得热稳定性和底物亲和力有显著改善的突变体V117HQ119E以及催化效率显著提高并在表面活性剂中稳定性提高的突变体F263W,其氨基酸序列分别为SEQ ID No.2和SEQ ID No.4所示。本发明显著改善了OPHC2的酶学性能,拓宽了OPHC2的应用领域和作用效率,在有机磷农药降解、机体解毒和神经毒剂洗消等方面应用前景广泛。