兔源对氧磷酶1突变体及其重组表达方法
基本信息
| 申请号 | CN202011091275.2 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN112226447A | 公开（公告）日 | 2021-01-15 |
| 申请公布号 | CN112226447A | 申请公布日 | 2021-01-15 |
| 分类号 | C12N15/55(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 龚晓洁;王璋 | 申请（专利权）人 | 北京森根比亚生物工程技术有限公司 |
| 代理机构 | 北京思元知识产权代理事务所（普通合伙） | 代理人 | 北京森根比亚生物工程技术有限公司 |
| 地址 | 101407北京市怀柔区雁栖经济开发区雁栖河西一路6号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了兔源对氧磷酶1突变体及其重组表达方法。本发明通过克隆分离大耳白兔PON1基因，经基因工程改造后获得多个点突变基因，根据大肠杆菌密码子偏好性对各突变基因进行密码子优化并构建携带不同标签的原核表达载体经诱导表达后，筛选到Trx‑rePON1和MBP‑rePON1蛋白，均可在大肠杆菌表达系统中产生完整、具有活性的可溶性蛋白，对乙酸苯酯和乙基对氧磷均具有较强的水解能力，对乙基对氧磷的水解活性分别是兔源本底血清PON1和家蚕中重组表达PON1活性的5和19倍。本发明实现了兔源PON1在大肠杆菌中的高效重组表达，为PON1在有机磷降解和生物医药领域的应用提供了新的选择。 |
