一种新型冠状病毒COVID-19-N蛋白表达和纯化的方法
基本信息
| 申请号 | CN202010481504.5 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN111499699A | 公开（公告）日 | 2020-08-07 |
| 申请公布号 | CN111499699A | 申请公布日 | 2020-08-07 |
| 分类号 | C07K14/165;C12N15/70;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22;C12R1/19 | 分类 | - |
| 发明人 | 李健;张进;钟芳林;万双燕 | 申请（专利权）人 | 深圳晶蛋生物医药科技有限公司 |
| 代理机构 | 新余市渝星知识产权代理事务所（普通合伙） | 代理人 | 深圳晶蛋生物医药科技有限公司;万双燕;李健;张进;钟芳林;江西晶美瑞生物医药有限公司 |
| 地址 | 518000 广东省深圳市坪山区坪山街道六联社区坪山大道2007号创新广场C1102 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种新型冠状病毒COVID‑19‑N蛋白表达和纯化的方法，步骤有：构建并转化COVID‑19‑N蛋白表达质粒；取菌液到含有50μg/ml Kan+抗生素的LB液体培养基培养，加入IPTG诱导培养；培养液离心，重悬，破碎后离心，取上清，选用镍柱纯化；依次用不同咪唑浓度的洗脱液进行洗脱，收集不同咪唑浓度的洗脱液；将纯化的COVID‑19‑N蛋白进行透析。本发明的有点有：使用Pet‑28a载体，利用大肠杆菌表达系统得到高产量、纯度高达98％以上的COVID‑19‑N蛋白，免疫原性高，稳定性好。该制备方法耗费成本低、操作简单，可重复性高，可投入大量生产。 |
