一种新型冠状病毒SARS-CoV-2木瓜样蛋白酶表达和纯化方法
基本信息
| 申请号 | CN202011351314.8 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN112481242A | 公开（公告）日 | 2021-03-12 |
| 申请公布号 | CN112481242A | 申请公布日 | 2021-03-12 |
| 分类号 | C12R1/19(2006.01)N;C12N9/50(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 张进;李健;钟芳林;万双燕 | 申请（专利权）人 | 深圳晶蛋生物医药科技有限公司 |
| 代理机构 | 新余市渝星知识产权代理事务所（普通合伙） | 代理人 | 廖平 |
| 地址 | 518000广东省深圳市坪山区坪山街道六联社区坪山大道2007号创新广场C1102 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种新型冠状病毒SARS‑CoV‑2木瓜样蛋白酶表达和纯化方法，步骤有：构建并转化表达质粒；取菌液到含有50μg/ml Kan+抗生素的LB液体培养基中，在摇床上培养，加入IPTG，诱导培养；菌液离心，在缓冲液中重悬，破碎离心取上清镍柱进行蛋白酶纯化，不同咪唑浓度的洗脱液进行洗脱，将含有PLpro的洗脱液用阴离子交换柱进行进一步的纯化，得到目的蛋白酶，本发明的优点有：利用大肠杆菌蛋白表达系统获得大量PLpro，并且周期短，耗费成本低，转化操作简单，可重复性高，可投入大量生产过程，能获得高纯度目标产物，为抗病毒研究提供基础。 |
