SARS主蛋白酶的表达和纯化方法
基本信息
| 申请号 | CN202010901715.X | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN111979214A | 公开（公告）日 | 2020-11-24 |
| 申请公布号 | CN111979214A | 申请公布日 | 2020-11-24 |
| 分类号 | C12N9/50;C12N15/70 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 李健;熊兵 | 申请（专利权）人 | 深圳晶蛋生物医药科技有限公司 |
| 代理机构 | 新余市渝星知识产权代理事务所（普通合伙） | 代理人 | 深圳晶蛋生物医药科技有限公司 |
| 地址 | 518000 广东省深圳市坪山区坪山街道六联社区坪山大道2007号创新广场C1102 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了SARS主蛋白酶的表达和纯化方法，步骤有：构建并转化表达质粒；取菌液到含有50μg/ml Kan+抗生素的LB液体培养基中，在摇床上培养过夜；加入IPTG，诱导培养；菌液离心，在重悬缓冲液中重悬；破碎离心，取上清镍柱纯化，不同咪唑浓度的洗脱液进行洗脱，将含有SARS主蛋白酶的洗脱液，进行透析得到目的蛋白。本发明的优点有：利用大肠杆菌蛋白表达系统可在短时间内获得大量SARS主蛋白酶，通过特殊的纯化方法可获得纯度高、稳定性好的SARS主蛋白酶。整个SARS主蛋白酶蛋白表达和纯化过程耗费成本低、操作简单、可重复性高，可投入大量生产过程。 |
