一种通过原生质体快速验证启动子强弱的方法

基本信息

申请号 CN201610837885.X 申请日 -
公开(公告)号 CN106755057B 公开(公告)日 2020-05-05
申请公布号 CN106755057B 申请公布日 2020-05-05
分类号 C12N15/82;G01N21/64 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 李阳;孙智光 申请(专利权)人 武汉伯远生物科技有限公司
代理机构 上海精晟知识产权代理有限公司 代理人 冯子玲
地址 430079 湖北省武汉市东湖开发区高新大道666号武汉国家生物产业基地项目B、C、D区研发楼B1栋(B8-5)
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提出了一种通过原生质体快速验证启动子强弱的方法,通过在同一个载体上用目标启动子和参考启动子分别驱动同一种荧光蛋白,在同一个细胞中表达,但是分别定位在不同的亚细胞位置,然后再利用同一个激光束激发荧光蛋白,此种情况下所有的其他参数都是一致的情况下,不同的亚细胞位置上的荧光亮度就可以代表启动子的强度,通过与参考启动子比较可以定量分析出目标启动子与参考启动子的倍比关系。本发明只需构建一次插入了待验证启动子序列的载体,然后用构建好的载体转化原生质体再在激光共聚焦显微镜下观察拍照通过比较对照启动子产生的荧光强度和需验证的启动子产生的荧光强度的方式快速评价启动子活性的强弱。