一种在大肠杆菌表达系统中高效表达外源蛋白的方法及其应用
基本信息
| 申请号 | CN202010096475.0 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN113265365A | 公开（公告）日 | 2021-08-17 |
| 申请公布号 | CN113265365A | 申请公布日 | 2021-08-17 |
| 分类号 | C12N1/21（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I;A61K39/12（2006.01）I;A61K39/245（2006.01）I;A61K39/235（2006.01）I;A61K39/23（2006.01）I;A61K39/39（2006.01）I;A61K39/00（2006.01）I;A61K45/06（2006.01）I;A61P33/12（2006.01）I;A61P31/14（2006.01）I;A61P31/20（2006.01）I;C12R1/19（2006.01）N | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 田克恭;李鹏昊;张许科 | 申请（专利权）人 | 普莱柯生物工程股份有限公司 |
| 代理机构 | 北京华夏正合知识产权代理事务所（普通合伙） | 代理人 | 韩登营 |
| 地址 | 471000河南省洛阳市高新区凌波路5号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明涉及一种高效表达外源蛋白的大肠杆菌构建方法及其应用，其中，所述方法包括：步骤（1）BL21（DE3）lpxM基因的敲除；步骤（2）将tig基因插入步骤（1）得到的BL21（DE3）lpxM基因缺失株；（3）重组载体pET28a‑Rcodon的构建；（4）外源蛋白基因克隆至步骤（3）得到的重组载体pET28a‑Rcodon；（5）将步骤（4）所得重组载体转化步骤（2）得到的菌株；以及步骤（6）外源蛋白的收获。本发明方法使得外源蛋白高效表达，能较大肠杆菌常规表达显著提高外源蛋白的表达量，内毒素含量大大降低，且本发明方法可应用到多种外源蛋白的高效表达，可广泛适用于真核生物来源的蛋白在内的多种兽医疫苗蛋白，具有广泛的适用范围。 |
