可二次验证碱基信息的DNA测序方法

基本信息

申请号 CN200910033400.1 申请日 -
公开(公告)号 CN101575639B 公开(公告)日 2012-04-18
申请公布号 CN101575639B 申请公布日 2012-04-18
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/76(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 陆祖宏;罗俊峰;白云飞;肖鹏峰;吕华 申请(专利权)人 无锡艾吉因生物信息技术有限公司
代理机构 南京君陶专利商标代理有限公司 代理人 奚胜元
地址 214000 江苏省无锡市无锡高新技术产业开发区菱湖大道东南大学无锡分校教学楼五楼505室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明可二次验证碱基信息的DNA测序方法涉及的是一种能够原位清除延伸标记物,能够二次验证同一个碱基位置的信息,逐个碱基鉴定未知DNA序列。该技术过程如下:1)3′端硫代修饰的测序引物与被固定的待测DNA序列进行杂交;2)加入第一次延伸反应溶液,延伸四种荧光标记的核苷酸单体,通过检测得到碱基信息;3)将2)中延伸上的核苷酸单体用酶进行切割清除;4)加入第二次延伸反应溶液,延伸荧光标记的可脱保护的硫代核苷酸单体,通过检测再次得到碱基信息;5)用化学试剂去除4)中延伸上的硫代核苷酸单体上的可脱保护基团和荧光基团;循环上述2)、3)、4)和5)所进行的过程,直到确定待测DNA中的碱基序列信息。