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一种快速评估CAR-T细胞体外杀伤效率的方法

基本信息

申请号	CN201810566144.1	申请日	-
公开（公告）号	CN108753916A	公开（公告）日	2018-11-06
申请公布号	CN108753916A	申请公布日	2018-11-06
分类号	C12Q1/66;C12Q1/06	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	邓文海;高基民;钱文斌	申请（专利权）人	杭州启澜生物医学技术有限公司
代理机构	杭州求是专利事务所有限公司	代理人	杭州启澜生物医学技术有限公司
地址	310000 浙江省杭州市滨江区长河街道滨安路688号4幢5层503室
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种简单、快速评估CAR‑T细胞体外杀伤效率的方法，包括步骤：1)贴壁或悬浮培养肿瘤细胞，其中所述肿瘤细胞为含有CAR‑T细胞特异性识别抗原表位并稳定转染荧光素酶基因的肿瘤靶细胞；2)加入CAR‑T细胞，获得CAR‑T细胞和肿瘤细胞的混合培养体系；3)离心沉淀所述的混合培养体系中的细胞，培养基重悬细胞后，加入荧光素酶底物，检测细胞的荧光素酶活力值，记为K；4)设置对照如下：所述培养体系中不加入CAR‑T细胞，检测细胞的荧光素酶活力值为Kmin；培养基中加入细胞裂解液导致最大程度的细胞杀伤，检测细胞的荧光素酶活力值为Kmax；5)计算CAR‑T对肿瘤靶细胞的杀伤效率公式：杀伤效率％＝(Kmin‑K)/(Kmin‑Kmax)x100％。