在杆状病毒-昆虫表达系统中生产眼镜蛇CT和PLA<sub>2</sub>的方法专利查询专利号|摘要-满商公司网

在杆状病毒-昆虫表达系统中生产眼镜蛇CT和PLA₂的方法

基本信息

申请号	CN201410041560.1	申请日	-
公开（公告）号	CN103804481A	公开（公告）日	2014-05-21
申请公布号	CN103804481A	申请公布日	2014-05-21
分类号	C07K14/46(2006.01)I;C12N9/16(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I;A61K38/46(2006.01)I;A61P29/00(2006.01)I	分类	有机化学〔2〕;
发明人	蒋和生;韦佩君;杨秀荣;鄢航;潘能庆	申请（专利权）人	南宁培元基因科技有限公司
代理机构	广州市红荔专利代理有限公司	代理人	南宁培元基因科技有限公司
地址	530003 广西壮族自治区南宁市大岭路98号广西科学院15楼
法律状态	-

摘要

一种在杆状病毒-昆虫表达系统中生产眼镜蛇蛇毒蛋白（CT）和磷脂酶A₂（PLA₂）的方法：利用RT-PCR的方法从眼镜蛇毒腺中分离表达CT和PLA₂成熟肽的DNA序列，构建昆虫病毒表达载体BM-CT和BM-PLA₂；将携带目的基因的载体和空载体转入Sf9昆虫细胞，获得病毒颗粒；用病毒颗粒感染细胞，经SDS-PAGE电泳检测目的蛋白的表达，用Ni柱洗脱的方法从细胞裂解上清中纯化出CT和PLA₂。用小鼠的扭体实验检测其镇痛活性，结果显示，CT处理组小鼠的扭动次数显著低于PLA₂处理组和对照组，说明获得的CT具有镇痛活性，效果好于PLA₂；PLA₂处理组鼠的扭动次数显著低于对照组，说明获得的PLA₂也具有镇痛活性。本发明涉及的CT和PLA₂蛋白可作为镇痛剂，应用于临床医学镇痛药物的开发利用和基础医学的研究。