一种高通量检测活细胞内SUMO修饰底物的方法及其应用
基本信息
| 申请号 | CN201511020132.1 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN105463053A | 公开（公告）日 | 2016-04-06 |
| 申请公布号 | CN105463053A | 申请公布日 | 2016-04-06 |
| 分类号 | C12Q1/02(2006.01)I;C12N15/867(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 任间;赵齐;蒋帅 | 申请（专利权）人 | 广州美格生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 广州粤高专利商标代理有限公司 | 代理人 | 广州美格生物科技有限公司 |
| 地址 | 510000 广东省广州市国际生物岛螺旋四路1号办公区第二层210单元 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种高通量检测活细胞内SUMO修饰底物的方法及其应用，该法基于BiFC系统，构建SUMO1、SUMO2/3的C端或N端连接YFPn的逆转录表达载体，将待检测对象的多个基因的cDNA克隆入含有YFPc的逆转录表达载体；病毒感染后，将同时稳定表达融合蛋白：SUMO-YFPn和待筛选蛋白-YFPc。如果是发生相互作用的蛋白，则可在FITC波长下观察到荧光信号，即筛选出活细胞内SUMO的修饰底物。该法可同时筛选SUMO1/2/3发生共价修饰和非共价修饰的蛋白底物，以及筛选在刺激和非刺激下SUMO共价或非共价修饰底物的结合情况，可筛选SUMO弱结合的蛋白底物，信噪比、灵敏度高，假阳性低。 |
