一种高通量检测蛋白相互作用的方法及其应用
基本信息
| 申请号 | CN201310157873.9 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN103361417B | 公开（公告）日 | 2015-04-08 |
| 申请公布号 | CN103361417B | 申请公布日 | 2015-04-08 |
| 分类号 | C12Q1/68(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 松阳洲 | 申请（专利权）人 | 广州美格生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 广州市越秀区哲力专利商标事务所（普通合伙） | 代理人 | 广州美格生物科技有限公司 |
| 地址 | 510000 广东省广州市番禺区广州国际生物岛螺旋三路一号办公区第二层210单位 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种高通量检测活细胞内蛋白相互作用的方法，以逆转录病毒为基础的BiFC系统，分别将“诱饵”蛋白cDNA克隆入含YFPn的逆转录病毒表达载体，而将18000个人类基因?cDNA分别克隆入含YFPc的逆转录病毒表达载体，通过逆转录病毒感染，产生同时稳定表达待筛选基因-YFPc融合蛋白和“诱饵”蛋白-YFPn融合蛋白的细胞，如果“诱饵”蛋白能与目标蛋白相互作用，通过流式细胞仪在FITC波长将观察到发荧光的细胞并能检测信号强弱。本发明用于筛选在刺激或非刺激条件下与目的蛋白相互作用的蛋白网络，可检测较弱或瞬时相互作用，信噪比高，假阳性率低，灵敏度高。 |
