一种可持续分泌LAL的载体、脐带间充质干细胞及其构建方法和应用
基本信息
申请号 | CN202210041232.6 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN114369620A | 公开(公告)日 | 2022-04-19 |
申请公布号 | CN114369620A | 申请公布日 | 2022-04-19 |
分类号 | C12N15/85(2006.01)I;C12N15/55(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12N5/0775(2010.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 张娇;邹翠云;朱国栋;江福能;钟惟德;朱建国 | 申请(专利权)人 | 广州辉园苑医药科技有限公司 |
代理机构 | 广州晟策知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人 | 王静 |
地址 | 510000广东省广州市国际生物岛螺旋三路12号第七层704单元 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种可持续分泌LAL的载体、脐带间充质干细胞及其构建方法和应用。本发明的可持续分泌LAL的载体包括:CMV增强子、CMV启动子、HSA基因、LAL基因、T2A基因、PuroR基因。其构建方法包括:构建pLVSO2‑HSA‑LAL质粒,基因合成HSA‑LAL序列,插入到pLVSO2载体。构建pT2‑HB‑CMV‑HSA‑LAL‑T2A‑PuroR质粒,以pLVSO2‑HSA‑LAL质粒为模板,扩增CMV增强子、CMV启动子、HSA、LAL、T2A、PuroR基因,重组到pT2‑HB质粒。将本发明pT2‑HB‑CMV‑HSA‑LAL‑T2A‑PuroR载体电转到脐带间充质干细胞,得到能持续分泌表达LAL的细胞系,并为该载体进一步应用于细胞治疗溶酶体酸性脂肪酶缺乏症(LAL‑D)打下基础。 |
