一种基于等温扩增的miRNA多位点联合检测方法

基本信息

申请号 CN202011405012.4 申请日 -
公开(公告)号 CN112430643A 公开(公告)日 2021-03-02
申请公布号 CN112430643A 申请公布日 2021-03-02
分类号 C12Q1/6844(2018.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 赵辉;高蕾 申请(专利权)人 昂凯生命科技(苏州)有限公司
代理机构 苏州中合知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 刘召民
地址 215000江苏省苏州市高新区锦峰路8号医疗器械产业园12栋301室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种基于等温扩增的miRNA多位点联合检测方法,主要包括以下步骤:1)针对每个目的miRNA序列设计合成一条特异性单链DNA探针,锁式探针与相对应的待检测miRNA片段进行杂交,形成多个杂化双链;2)连接步骤1)杂交成功的锁式探针的两端;3)对步骤2)连接产物进行滚环等温扩增;4)使用特异性磁珠对步骤3)产物片段进行杂交;5)使用链霉亲和标记的荧光染料对步骤4)产物进行荧光标记;6)检测步骤5)产物荧光信号。本发明无需进行逆转录,节省成本,降低损失;特异性好,可区分单个碱基;多重检测;可应用于各领域多位点miRNA的定量检测,包括但不限于癌症筛查、疾病诊断、科学研究等。