一种用于检测基因突变的长度依赖探针制备方法

基本信息

申请号 CN201410363255.4 申请日 -
公开(公告)号 CN104099424A 公开(公告)日 2014-10-15
申请公布号 CN104099424A 申请公布日 2014-10-15
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 何骏奇;毛丹丹;王校;卞雪莲 申请(专利权)人 上海中优医药高科技股份有限公司
代理机构 - 代理人 -
地址 200433 上海市杨浦区国泰路11号705-706室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种用于检测基因突变的长度依赖探针的制备方法,包括以下步骤:1)选择与待测目标序列无关的载体作为模板,并根据目标核苷酸序列和无关序列设计长度一代探针对的扩增引物序列;2)人工合成引物;3)PCR扩增;4)PCR产物纯化回收;5)使用T7外切酶对PCR产物进行消化;6)回收ssDNA。本发明所述MLPA探针制备方法成本低廉,只需要PCR仪即可完成扩增、酶切等全部操作,利用T7外切酶消化排除了没有消化完全的dsDNA和核苷酸,提高了探针制备效率,提高MLPA实验时的杂交效率。