一种停滞棒杆菌的高效转化方法
基本信息
| 申请号 | CN202011389348.6 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN112430561A | 公开（公告）日 | 2021-03-02 |
| 申请公布号 | CN112430561A | 申请公布日 | 2021-03-02 |
| 分类号 | C12R1/15(2006.01)N;C12N1/21(2006.01)I;C12N15/77(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 蔡友华;郑穗平;谢莹玉;赵楠楠;谢学敏;余宇坚 | 申请（专利权）人 | 广东肇庆星湖生物科技股份有限公司 |
| 代理机构 | 广州粤高专利商标代理有限公司 | 代理人 | 杨利娟 |
| 地址 | 526040广东省肇庆市端州区工农北路67号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明属于分子生物学技术领域，具体为一种适用于停滞棒杆菌的高效转化方法。其转化方法重点对停滞棒杆菌电转化条件进行系统优化，通过对培养基、电场强度等因素的系统优化，提高转化效率，从而实现对停滞棒杆菌基因组的编辑，达到构建目标工程菌的目的。控制起始光密度值OD 600nm参数为0.29～0.31，将上述种子液转接入优化后的感受态培养基中，在31～32℃，249～252rpm培养，使OD 600nm参数达到0.7～1.1；当OD600nm值为0.7～1.1的感受态细胞，1μg的质粒用量，6min的冰浴时间，10％甘油、1.8KV、5ms、连续电击3次，恢复时间为3h组合的转化效率最高，达到了331cfu/μg。本发明的停滞棒杆菌的高效转化方法操作简单，转化率高。 |
