一种基因编辑单细胞的快速筛选方法
基本信息
申请号 | CN202110845483.5 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN113584127A | 公开(公告)日 | 2021-11-02 |
申请公布号 | CN113584127A | 申请公布日 | 2021-11-02 |
分类号 | C12Q1/6806(2018.01)I;C12Q1/686(2018.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 石宏;邱志超;翟平生 | 申请(专利权)人 | 云南聚云基因工程有限公司 |
代理机构 | 北京酷爱智慧知识产权代理有限公司 | 代理人 | 刘志刚 |
地址 | 650106云南省昆明市高新区科高路新光巷285号沃霖大厦第七层 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种基因编辑单细胞的快速筛选方法,包括将单一细胞于96孔细胞培养板中进行扩大培养后,取出部分细胞悬液置于96孔PCR板中;将96孔PCR板进行密封、离心、静置、再离心,采用96孔吸液板吸去上清液;在去除上清液的96孔PCR板中加入PH为8.0的1xTE buffer缓冲液,密封96孔PCR板后,于95℃下处理8~12min,再进行离心处理,收集上清,即得细胞基因组DNA;以细胞基因组DNA为模板扩增包含基因编辑位点的基因片段,再进行测序,根据测序结果确认基因编辑的单细胞;该方法将96孔培养板中的细胞一一对应96孔PCR板,再经DNA提取后直接进行PCR扩增,该方法操作简单、省时省力,并且避免了人为编板号错误的问题。 |
