一种基于高通量测序构建鼠TCRA文库的多重PCR引物及方法专利查询专利号|摘要-满商公司网

一种基于高通量测序构建鼠TCRA文库的多重PCR引物及方法

基本信息

申请号	CN201610821985.3	申请日	-
公开（公告）号	CN106282179A	公开（公告）日	2017-01-04
申请公布号	CN106282179A	申请公布日	2017-01-04
分类号	C12N15/11(2006.01)I;C40B50/06(2006.01)I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	范盘生;李仁强;于海礼	申请（专利权）人	北京天科雅生物科技有限公司
代理机构	北京中济纬天专利代理有限公司	代理人	北京天科雅生物科技有限公司;重庆天科雅生物科技有限公司
地址	102206 北京市昌平区回龙坝镇中关村生命科学园生命园路8号院一区1号楼3层332室
法律状态	-

摘要

本发明公布了一套基于高通量测序技术的多重PCR引物及其方法，用该方法来扩增鼠T淋巴细胞群TCRA基因mRNA，对扩增子文库进行测序以产生T细胞受体库的免疫应答谱，了解免疫状态并揭示发病机制。具体为以mRNA为模版高覆盖的扩增T淋巴细胞TCRA基因CDR3区域，同时获得VDJC片段的组合信息。构建TCRA基因扩增子文库的引物包括：正向引物一组共39个，通过一一对应方式覆盖23个V片段；反向引物一组共32个，由测序接头、key序列、barcode编码及TRAC特异性反向互补序列串联组成，其中barcode序列分为32种，可在一次测序实验中测序32个样本。通过该种方法，可以有效的扩增98个有功能的TRAV片段，同时对TRAJ片段实现无偏差扩增，为免疫组学的基础及临床研究提供帮助。