L-色氨酸产量提高的重组大肠杆菌及其构建方法与应用

基本信息

申请号 CN202010033337.8 申请日 -
公开(公告)号 CN111154706B 公开(公告)日 2021-05-11
申请公布号 CN111154706B 申请公布日 2021-05-11
分类号 C12N1/21;C12N15/70;C12N15/54;C12N15/66;C12P13/22;C12R1/19 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 刘龙;周人楷;翟秀超;陈泰驰;吕雪芹;李江华;堵国成 申请(专利权)人 无锡中粮工程科技有限公司
代理机构 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 王玉仙
地址 214100 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种L‑色氨酸产量提高的重组大肠杆菌及其构建方法与应用。本发明是以大肠杆菌CICC10303作为出发菌株,采用易错PCR和CRISPR‑Cas9基因编辑技术,敲除关键基因trpR解除了色氨酸合成和转运关键酶受到的反馈阻遏调控,敲除预苯脱氢酶编码基因pheA后解除苯丙氨酸合成途径的竞争后,利用基因随机突变试剂盒随机突变L‑色氨酸合成相关基因aroK的启动子序列ParoK,构建得到5株重组菌ECTR1、ECTR2、ECTR3‑1~ECTR3‑3,其中ECTR3‑2使得L‑色氨酸的发酵罐产量得到了显著提高,达到了40g/l,为进一步代谢工程改造大肠杆菌生产L‑色氨酸奠定了基础。