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一种高产α-酮戊二酸酵母工程菌及其应用

基本信息

申请号	CN201210066444.6	申请日	-
公开（公告）号	CN102586128B	公开（公告）日	2014-04-09
申请公布号	CN102586128B	申请公布日	2014-04-09
分类号	C12N1/19(2006.01)I;C12N15/60(2006.01)I;C12P7/50(2006.01)I;C12R1/645(2006.01)N	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	陈坚;周景文;殷晓霞;堵国成;李江华;胡志杰;蒋小东;孙福新	申请（专利权）人	宜兴协联生物化学有限公司
代理机构	北京汇信合知识产权代理有限公司	代理人	江南大学;宜兴协联生物化学有限公司;江苏国信协联能源有限公司
地址	214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种通过强化丙酮酸羧化途径促进α-酮戊二酸积累的方法，将来源于米根霉(Rhizopus?oryzae)中编码丙酮酸羧化酶的基因RoPYC2过量表达于发酵法生产α-酮戊二酸的菌株Yarrowia?lipolytica?WSH-Z06中，获得了一株丙酮酸羧化酶活性提高的重组菌，其丙酮酸羧化酶活性提高了10.2倍(达到0.87U/mg?protein)；以甘油为唯一碳源，发酵144h后，α-酮戊二酸产量达到47.2g/L，是出发菌株的1.3倍；丙酮酸产量降低到10.4g/L，是出发菌株的49.0％。本发明通过调控三羧酸循环的回补途径，成功实现了碳代谢流从丙酮酸节点流向α-酮戊二酸节点，在提高α-酮戊二酸产量的同时，减少了副产物-丙酮酸的生成。为今后利用代谢工程手段改造菌株促进目标产物过量积累提供了一定的借鉴意义。