一种杀伤活性增强的NK细胞及其制备方法

基本信息

申请号 CN201811586110.5 申请日 -
公开(公告)号 CN109666639B 公开(公告)日 2021-03-26
申请公布号 CN109666639B 申请公布日 2021-03-26
分类号 C12N13/00(2006.01)I;C12N5/0783(2010.01)I;A61K35/17(2015.01)I;C12N5/078(2010.01)I;A61P35/00(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 方维佳;彭富强;许震宇;郑怡;涂晓璇;谢信飞 申请(专利权)人 浙江生创精准医疗科技有限公司
代理机构 北京三高永信知识产权代理有限责任公司 代理人 邢惠童
地址 310058浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及一种杀伤活性增强的NK细胞及其制备方法,所述方法包括:a.从外周血单个核细胞PBMC制备饲养细胞,和b.NK细胞扩增,所述步骤a是PBMC用CD3单抗进行初步刺激后,在含有IL‑2、IFN‑r、IL‑15和IL‑18的第一培养基中继续激活,获得抗原呈递的初步激活的PBMC,将上述激活的PBMC用γ‑射线进行辐照后作为饲养细胞,并将部分饲养细胞液氮冻存;所述步骤b是将未经上述激活的原始PBMC或通过免疫磁珠分选法去除CD3+T淋巴细胞并可选地再次富集CD56+后的NK细胞与未经液氮冻存处理的饲养细胞混合孵育,在含有IL‑2、IL‑15、OK432和烟酰胺的第二培养基中进行NK细胞的扩增培养,然后转为添加含有IL‑2、烟酰胺的第三培养基扩增培养,之后继续添加从液氮冻存复苏的饲养细胞,继续扩增培养。