用于检测CRISPR/Cas9基因编辑系统切割基因产生移码突变的基因元件及应用

基本信息

申请号 CN201811320658.5 申请日 -
公开(公告)号 CN109371167A 公开(公告)日 2019-02-22
申请公布号 CN109371167A 申请公布日 2019-02-22
分类号 C12Q1/6897;C12N15/90;C12N15/85;C12N15/10;C12N1/21;C12R1/19 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 鲁文静;兰峰;张治宇 申请(专利权)人 北京赛贝生物技术有限公司
代理机构 北京康信知识产权代理有限责任公司 代理人 北京赛贝生物技术有限公司
地址 100220 北京市昌平区北清路中关村生命科学园创新大厦A座214
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种用于检测CRISPR/Cas9基因编辑系统切割基因产生移码突变的基因元件及应用。该基因元件包括有效连接的启动子、第一报告基因、REST基因、SV40pA基因、S沉默子、第二报告基因和终止子,其中,启动子与第一报告基因基因之间可插入被切割目标DNA序列,第一报告基因不同于第二报告基因,REST基因的表达能够抑制S沉默子后面第二报告基因的表达。用于检测CRISPR/Cas9基因编辑系统切割基因产生移码突变的基因元件可作为核心元件连接到载体中,可以用来在活细胞胞内鉴定gRNA对基因组的切割效率,该检测具有产生移码突变时是即时荧光表现型、高稳定性的荧光表型和易操作性。