一种基于高通量测序的mRNA检测方法

基本信息

申请号 CN201911106264.4 申请日 -
公开(公告)号 CN111118126A 公开(公告)日 2020-05-08
申请公布号 CN111118126A 申请公布日 2020-05-08
分类号 C12Q1/6869 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 毕书琳;吴渊;石银;陈学俊;杨爽;王剑青;周文刚;郑方克;郑立谋 申请(专利权)人 上海厦维生物技术有限公司
代理机构 厦门市首创君合专利事务所有限公司 代理人 上海厦维生物技术有限公司;上海厦维医学检验实验室有限公司
地址 200000 上海市闵行区新骏环路138号3幢201,202室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及一种基于高通量测序的mRNA检测方法,包括如下步骤:1)提取样本总RNA并质控;2)根据总RNA质控情况进行总RNA打断和/或引物杂交;3)合成cDNA第一链;4)合成cDNA第二链;5)构建链特异性cDNA文库;6)第一次杂交和捕获;7)第二次杂交和捕获;8)捕获后文库扩增及纯化;9)高通量测序。本发明采用杂交捕获的方式,特异性富集链特异性cDNA序列,进行mRNA表达检测。本发明在极低起始量和低质量情况下仍能保证良好的检测性能。