一种基于高通量测序的线粒体基因组文库及其构建方法
基本信息
| 申请号 | CN201610308792.8 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN105907748B | 公开（公告）日 | 2017-10-13 |
| 申请公布号 | CN105907748B | 申请公布日 | 2017-10-13 |
| 分类号 | C12N15/10(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C40B50/06(2006.01)I;C40B40/06(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 张巍 | 申请（专利权）人 | 广州嘉检医学检测有限公司 |
| 代理机构 | 北京市盈科律师事务所 | 代理人 | 广州嘉检医学检测有限公司 |
| 地址 | 510000 广东省广州市广州国际生物岛螺旋四路九号二期4C栋201单元 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明涉及一种基于高通量测序的线粒体基因组文库及其构建方法。所述构建方法包括以下步骤：S1、自总DNA中一步PCR扩增线粒体全长DNA；S2、将线粒体全长DNA打碎，得到DNA片段；S3、对DNA片段进行末端修复，得到平末端DNA片段；S4、在平末端DNA片段3’端加A，得到加A的DNA片段；S5、在加A的DNA片段的3’端加接头，得到加接头的DNA片段；S6、对加接头的DNA片段进行前LM‑PCR；S7、对LM‑PCR产物进行后PCR。本发明线粒体基因组文库构建方法通过自总DNA中一步PCR扩增得到线粒体全长DNA，可以保障人类线粒体基因组的精确扩增，不被在人类基因组的同源序列污染混合使突变检测更灵敏和准确。 |
