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一种多重PCR引物筛选方法及应用

基本信息

申请号	CN202010923135.0	申请日	-
公开（公告）号	CN112029877A	公开（公告）日	2020-12-04
申请公布号	CN112029877A	申请公布日	2020-12-04
分类号	C12Q1/689(2018.01)I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	董思远;郭静;杨思雨;舒芹;张雪娇;赵愿安	申请（专利权）人	华芯生物科技（武汉）有限公司
代理机构	武汉智嘉联合知识产权代理事务所（普通合伙）	代理人	黄君军
地址	430000湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道818号武汉高科医疗器械园B区11号楼3层3号
法律状态	-

摘要

本发明涉及一种多重PCR引物筛选方法及应用，包括：S1、针对单个目的片段进行单重PCR反应；S2、每个目的片段选取一对引物，并将引物随机组合，每组3‑4对引物，分别进行小型多重PCR体系优化；S3、将步骤S2筛选得到的引物混合，进行总多重PCR，选取扩增效率高且无特异性扩增的引物。同时本发明还提供了利用上述筛选方法得到的一种13种呼吸道病原微生物多重PCR检测试剂盒，包括13对引物，具体如SEQ ID NO.1‑26所示。本发明的筛选方法可达到快速检测并筛选引物的目的，显著缩短了多重PCR体系的优化周期，降低了优化难度，且本发明的检测试剂盒可同时检测13种常见的呼吸道病原微生物，不仅降低了检测成本，节省检测时间，而且检测效率高，适合临床大规模使用。