一种得到雷公藤甲素的肝微粒体体外代谢产物的实验方法专利查询专利号|摘要-满商公司网

一种得到雷公藤甲素的肝微粒体体外代谢产物的实验方法

基本信息

申请号	CN202110890893.1	申请日	-
公开（公告）号	CN113804776A	公开（公告）日	2021-12-17
申请公布号	CN113804776A	申请公布日	2021-12-17
分类号	G01N30/02（2006.01）I;G01N30/06（2006.01）I;G01N30/34（2006.01）I;G01N30/72（2006.01）I	分类	测量；测试;
发明人	彭冉;杨林青;周昕琪;于海勤;孔娟	申请（专利权）人	山东晶辉生物技术有限公司
代理机构	济南泉城专利商标事务所	代理人	张贵宾
地址	274000山东省菏泽市牡丹区延河路505号
法律状态	-

摘要

本发明提供一种得到雷公藤甲素的肝微粒体体外代谢产物的实验方法，包括以下步骤：S1：制备大鼠肝微粒体；S2：将步骤1中制备的5μL肝微粒体，2μL的0.2mg/mL雷公藤甲素，20μL NADPH系统和0.05mM Tris/HCl组合，最终构成体积为200μL的微粒体体系；S3：将上述肝微粒体体系进行温孵，温孵时间点为0，15，60，90，120分钟；S4：取100μL步骤3中的温孵液加入10μL含1μg/mL的内标溶液，沉淀蛋白后，以12000rpm离心5分钟，取上清进行LC‑MS/MS的定量分析，进样量1μL；S5：剩余温孵液加入3倍体积的冷乙腈，12000rpm离心5分钟后，取全部上清于氮气条件下常温吹干，以100μL的甲醇：水，体积比为1：1复溶，用于代谢产物鉴定。