重组肠道病毒71型病毒VP1抗原的纯化方法
基本信息
| 申请号 | CN201010202876.6 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN101857871B | 公开（公告）日 | 2012-02-29 |
| 申请公布号 | CN101857871B | 申请公布日 | 2012-02-29 |
| 分类号 | C12N15/41(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C07K14/085(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 吴强;周林福 | 申请（专利权）人 | 杭州浙大紫金生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 杭州中成专利事务所有限公司 | 代理人 | 金祺 |
| 地址 | 310013 浙江省杭州市滨江区南环路4028号1号楼307室 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明涉及基因工程重组蛋白的纯化方法，旨在提供一种重组肠道病毒71型病毒VP1抗原的纯化方法。该方法包括：利用大肠杆菌表达生产重组肠道病毒71型病毒VP1蛋白，得到该蛋白的包涵体；将包涵体溶解于增溶液中；在水浴和磁力搅拌条件下向复性液中逐滴加入包涵体溶液，然后在搅拌复性48小时。本发明提出通过蛋白复性能使以包涵体形式存在的蛋白变成可溶性蛋白，大大提高了表达产物的回收率。采用亲和层析一步纯化，纯度大于95％。纯化的方法操作简单、方便、省时，有利于大规模的工业化生产。具有成本低廉、工艺简便，纯化蛋白纯度高等优点，可以为EV71型诊断试剂的开发和血清流行病学调查提供诊断用抗原。 |
